“今年是数字PCR临床应用元年！”，这句话在数字PCR的历史上反复出现过多次，但直到现在，数字PCR依然只是一种非常有价值的科研工具，而临床诊断应用？

那依旧只是一个目标，并非现实。

不过，情况正在发生变化，这需要感谢NGS企业对市场的不断教育，考虑到成本、周转时间等问题，在癌症领域，已经有很多临床医生开始尝试用数字PCR取代NGS。

Bio-Rad Laboratories、Qiagen、Roche和Thermo Fisher Scientific，这几家数字PCR大玩家敏锐的意识到了这个变化，并对他们的开发策略进行了微调——同时与第三方试剂盒开发商河服务提供商开展合作。

毕竟，在当下这个节骨眼上，通过开放系统扩大整个数字PCR市场，才是至关重要的事情。

随着越来越多的试剂盒出现，数字PCR的那些技术优势——绝对定量，超多重检测，以及比NGS低的多的成本——开始在临床癌症领域引起共鸣。

临床经济学

在当下的癌症检测当中，小Panel的价值正在被认可。

今年二月份，臻悦生物获批的人类8基因突变联合检测试剂盒（可逆末端终止测序法），就是一个针对8基因的小Panel。

毕竟，如果想要产品能够在更大范围内使用，就得让医生能够理解检测结果的意义，并且可以采取适当的行动，这就要求你的生物标志物是比较成熟的。

毕竟，能够根据意义尚不明确的生物标志物检测结果，做出合适判断的大拿医生，并不多。

但在小Panel这样的场景下，数字PCR比NGS测得更快、成本更低。

对于NGS来说，最重要的护城河之一，就是能够在一次运行当中对大量的生物标志物进行评估，但这个优势在多重数字PCR面前不复存在。

数字PCR的开发商正在从物理和化学这两个方面来扩展数字PCR的多重能力。

像当前正在被Bio-Rad收购的Stilla，它的光学通道数量就达到了7个，而QX600也有6个通道。

Pxlence和ChromaCod这些企业也通过新的化学方法增加了每次反应可以检测的目标数量，而Stilla的法国合作者所开发的31-plex液体活检测试，更是一个高多重性研究的出色例子。

如果数字PCR平台能够实现多重检测的数量级增长，比如一次测100个，那么它的超低灵敏度和单分子绝对定量能力，会让这项技术成为NGS在血液癌症检测领域的有力竞争者，特别是在那些对于性能要求非常高的低丰度检测当中。

而且，多重检测可能还会带来一个意想不到的优势——降低成本。

现在数字PCR的单个样本检测成本还是很高的，这也时常被认为是阻碍数字PCR走向临床市场的因素，但如果检测的重数上去了，那么单个Biomarker的成本，会相当低。

战略转向的启示

我在《tNGS这个故事，带给我们很多不一样的看法……》这篇文章当中，探讨了一款试剂在什么时候需要去申报注册的问题。

同样的情况，也在数字PCR领域上演。

当行业都认为，Qiagen的BCR-ABL测定——这是一款用于测量白血病治疗反应的试剂——将在2025年冲击FDA认证时，Qiagen却表示他们将暂缓IVD申报计划，而转向扩展RUO（科研用途）产品矩阵。

这是一个明智的做法。

当下，数字PCR在临床应用上面并不成熟，最简单的一点，在常规的临床护理当中，是没有数字PCR的位置。

一个全新的产品在进入到这个场景的过程当中，必然会收到很多客户投诉，在处理这些投诉的过程当中，有必然会涉及到对产品进行变更的问题。

对于一个市场规模还比较小，场景还处于摸索状态，需要针对客户需求做出快速响应的产品来说，套上重监管的枷锁并不合适。

坦率的说，对于这样不成熟的产品来讲，并不是拿了一张注册证，就能卖的好的，领先一步是先驱，领先三步是先烈。

其他数字PCR巨头也都采取了深耕RUO市场的策略。

去年，Bio-Rad公司就推出了由英国癌症研究所研究人员参与开发ddPLEX ESR1突变检测试剂盒，该试剂盒可以从福尔马林固定、石蜡包埋的组织样品和血浆样品中区分并量化7种基因变异，可用于指导晚期乳腺癌的治疗。

而赛默飞世尔目前的目标也是为客户提供可靠、精确的工具，该公司的Absolute Q数字PCR系统支持TaqMan测定法以及许多第三方试剂。

构建开放生态

数字PCR从IVD转向RUO的主要原因，就是参与的玩家，太少，只有把盘子做大，大家才能有钱赚。

正在收购Stilla的Bio-Rad在这方面动作频频。

它正在与Allegheny Health Network和丹麦奥胡斯大学医院分子医学系合作，为实体瘤患者治愈后MRD监测提供临床证据。

而且，最近还投资了Geneoscopy及其基于数字液滴PCR的ColoSense结直肠癌测试，这项测试在去年获得了FDA的批准，目前由Laboratory Corporation of America提供商业合作。

同时，Bio-Rad授权试剂盒供应商计划成员Gencurix的非小细胞肺癌EGFR测定法最近被三星首尔医院采用。

Gencurix还将继续开发非小细胞肺癌、CRC、黑色素瘤、甲状腺癌和子宫内膜癌的测定法。

做为数字PCR的巨头之一，Qiagen也不示弱，这家公司正在与选定的第三方开发商合作，以扩大临床肿瘤学中数字PCR的生态系统，合作领域包括伴随诊断、LDT等等。

比如，Qiagen支持布朗大学健康罗德岛医院的研究人员，他们正在QiAcuity-Dx系统上开发一种基于血液的肺炎病原体RNA测试。

正因为数字PCR设备厂家的开放态度，不少IVD厂家和ICL实验室也被吸引过来。

像GT Molecular公司就利用其专有的化学试剂，开发出多种超灵敏、多靶点检测的数字PCR测定。

这些测定可不是只能在一种型号上，而是可以同时运行在Bio-Rad的QX200和QX600、Thermo Fisher的Absolute Q、Roche的数字光循环仪和Qiagen的QiAcuity上。

通过开放的生态，试剂开发团队能够快速响应市场需求，以及满足商业和政府合作伙伴的定制要求。

精准诊疗的拼图

癌症是个复杂疾病，换句话来说，没有任何一项检测技术，可以单独给出合理的癌症治疗方案。

对于数字PCR来说，要想在融入癌症护理这个场景，那就必须和其他检测方法相结合。

比如，赛默飞世尔就利用其qPCR和NGS能力提供组合解决方案，这些互补技术可满足临床肿瘤学中的不同用例。

而Qiagen也将数字PCR技术纳入了他们的伴随诊断套餐当中，无论是qPCR、dPCR还是NGS、无论是FFPE还是血浆，Qiagen都能提供相应的产品。

很多厂家也在开发这样的技术融合产品。

比如Naveris这家公司，就开发了一款能在血液当中检测宫颈癌的多组学测定NavDx+Gyn，能够测出14种高危HPV菌株。

在这款产品当中，采用的就是Qiagen的数字PCR系统。

毕竟，在血液当中，HPV菌株碎片的峰度非常低，需要精确又可靠的分子检测技术，才能提供有意义的临床效用，并且使患者获益。

虽然基因检测市场遭到了冲击，但精准医疗依旧处于一个快速发展的状态当中，只不过是过去的牛皮吹得太大，吹破了。

但这反而是数字PCR的一个机会，毕竟，需求还在那里，但又不会像之前那样，由NGS包打天下。

数字PCR将会成为精准诊疗的一个重要组成部分。

对于Qiagen来讲，这将是未来必然发生的事情，所以它给自己设了一个雄心勃勃的目标——

到2028年，其数字PCR业务要翻三倍，达到2.5亿美元。

来源：诊断科学